
齧齒類動物血常(cháng)規結果分析注意事項
血液學檢查是動物(wù)疾病狀態評估、術前檢查和(hé)常規體(tǐ)檢中必不可少的內容。評估血常規檢測報告的可靠性並解讀其結果是獸醫朋友們的工作日常。本文就血液學檢查的(de)一些(xiē)要點進(jìn)行分析探討。
采(cǎi)血(xuè)是進行血常規檢查的第一步(bù),本公眾號曾經發表《獸醫隨筆:實驗(yàn)動物采(cǎi)血指南》一文,介(jiè)紹采血量和采(cǎi)血點的一般指導意見。
進行血液學分析(xī)時通常建議用EDTA抗凝管(guǎn)采集樣本,但采集時應該(gāi)注意抗凝劑和血液的比例。樣本質量會顯著影(yǐng)響檢測結果,常見的樣本質量問題有:
抗凝效果不佳導致出現血凝塊,會使血小板(PLT),白細胞(WBC),紅細胞(RBC),紅細胞(bāo)壓積(HCT)假性降低;
溶(róng)血會使RBC、HCT假性降低的同時(shí)平均(jun1)紅細胞血紅蛋白濃度(MCHC)、平均紅細胞血紅蛋白(MCH)假性升高;
乳(rǔ)糜血會使血(xuè)紅蛋白(Hb)、MCHC、MCH假性升高;
樣本(běn)不新鮮會(huì)使紅細胞(bāo)形態發(fā)生改變導致MCV和HCT假性升高,MCHC假性(xìng)降(jiàng)低,同時白細胞形態也會發生改變。
紅細胞、白細胞和血小板是血常規報告中需要解讀的三個方麵。
紅細胞(bāo)
相比於人及其他(tā)哺乳類動物,齧齒(chǐ)類動(dòng)物的紅細胞自有其特(tè)征。倉(cāng)鼠的RBC約(yuē)6.0微米,豚(tún)鼠的約7.8微米。大鼠出生時紅細胞較大(10.03 μm),但在(zài)出生後30天內變到小(xiǎo)於6μm。小鼠RBC大(dà)小約4-7μm,隨年齡增長而增加。多色性是齧齒(chǐ)類動物血象的一個常見特征。在豚鼠血塗片上還可見紅細胞疊連。特定疾病模型小鼠中,如β地中海貧血模型小鼠RBC可觀(guān)察到異常形態,例如靶形紅細胞、棘形狀(zhuàng)紅(hóng)細胞(bāo)、淚滴狀紅細胞、破碎狀紅細胞、有核紅細胞等。
(圖片來源(yuán):https://www.researchgate.net/publication/233535082)
和大多數哺乳動物(包括(kuò)人)不同的(de)是,新生齧齒類動物(小鼠、大鼠、豚鼠、沙鼠)的血紅蛋白和血細胞比容值低於成年動物(wù);新出生大鼠有16%的網織紅細胞,成年後則減少至2.5%;據報道,大鼠、沙鼠的RBC計數存(cún)在性別差異,雌性(xìng)的計數通常比雄性高。不同品係的小(xiǎo)鼠和大鼠,血紅蛋白值也會有很大的差異。
樣本采集部(bù)位或麻醉的影(yǐng)響會導致血常規數據的變化。例如,從大鼠尾部采集的樣本中的血紅蛋白和紅細胞比容比從(cóng)腹主動脈或心髒中采集的樣本中要高。豚鼠(shǔ)中已經證實RBC值可能由於麻醉期間發生脾內紅細胞扣留而降低。
影響RBC參數(shù)的非致病性條件還包括(kuò)妊娠、季節變化等。在大鼠中,紅細胞比容在妊娠期間減少。在倉鼠中,RBC計數、血紅蛋白濃度和紅細胞比容在冬眠期間升(shēng)高,這是因為在冬眠期間,倉鼠基礎代謝率(lǜ)降低,RBC壽命延長了。
紅細胞和貧血
紅細胞指標(biāo)重點關注RBC、HCT和Hb,它們的變化可以提示動物貧血或紅細胞增多。
齧齒類動物中並沒有原發性的紅細胞增多症,但可能見於輕度脫水的動物。貧血(xuè)則較(jiào)為常(cháng)見。初步判斷為貧(pín)血後,還需要關注平均紅細胞體(tǐ)積(MCV),MCH和MCHC,可用於輔(fǔ)助判斷貧血類型,這(zhè)三項(xiàng)都偏低常見於缺鐵性貧血,而(ér)高於正常範圍多見於葉酸或維生素B12缺乏引起的貧血。網織紅細胞(bāo)是尚未完全成熟的紅細胞,是反映骨髓造血功能的重要(yào)指標。當(dāng)其升高(gāo)時,提示(shì)骨髓造血功能旺盛,可能有(yǒu)溶血性貧血、缺鐵性貧血等;而當其降低時,可能有再(zài)生障礙性貧血、急(jí)性白血病等。
儀器分析的血常規化驗單隻能給出各種(zhǒng)細胞的數(shù)量(liàng),但(dàn)並不能給出細(xì)胞形態的異常描述。因(yīn)此為(wéi)了更(gèng)準確分析血液學(xué)檢查結果還建議對血樣塗片進行形態學檢查。
RBC形態學可區分貧血(xuè)的原因:出血、溶(róng)血、缺鐵、非再生性貧血、骨髓疾病或淋巴細胞增生性疾(jí)病(白血病(bìng))等。
如果診斷為溶血性貧血,則需要在血塗片(piàn)中(zhōng)尋找血液寄生蟲的(de)證據,如球狀附(fù)紅細胞體和鼠血(xuè)巴爾通體可能導致(zhì)小鼠或大鼠貧血。如果出(chū)現小紅細胞增多症、血色素減少、總蛋白低、血小(xiǎo)板增多(duō)和網織紅細胞計數升高則提示有慢性失血,建議檢查體表寄(jì)生蟲,在虱子嚴重感(gǎn)染的豚(tún)鼠和大鼠中可見這種現象。
白細胞
白細胞是機體抵禦感染、調控炎症、免疫和造血的關鍵。
齧齒類動物的白細胞形態和其他哺乳動物相(xiàng)似,但又有一定(dìng)區別,齧齒類動物的粒細胞被稱為嗜異性或假嗜酸性粒細胞,因為它含有紅色顆粒,與(yǔ)嗜酸性粒細胞相(xiàng)似。豚鼠有獨特的Foa-Kurloff細胞(bāo)(一種(zhǒng)T淋巴細胞),含有一個大的(de)細胞質包涵體。齧齒類動物的白細胞(bāo)類型與(yǔ)其他哺乳動物相似,但淋巴細胞數量遠超過(guò)粒細胞:淋巴細胞約占86%,中性粒細胞約占10% ~ 25%,單核細胞約占6%,嗜酸性(xìng)粒細胞約占(zhàn)1% ~ 4%,嗜堿(jiǎn)性粒細胞很少。
WBC計數每天都會發生波動,因此采集樣本的位置和時間不同,結果也可能不同(tóng)。中性粒細胞計數隨著大鼠年齡的增長而增加,淋巴細(xì)胞計數隨著年齡的增長而減少。
豚鼠的Kurloff 細胞
(圖片來源:https://en.wikipedia.org/wiki/Kurloff_cell)
白細胞:淋巴細胞
淋巴細胞增多
淋巴細胞分為T淋巴細胞(bāo)和B淋巴細胞,大多在外(wài)周淋巴(bā)組織中生成並在血液和淋巴組織中循環。淋巴細胞的增多大多為生理性的。反應性淋巴細胞增多的原因(yīn)包括注射疫苗後的短暫反應、長期免疫刺(cì)激、甲狀(zhuàng)腺(xiàn)功能亢進等;腎上腺皮質功能減退也會導致淋巴細胞增多,並常伴隨低血糖、電解質異常,出現高鉀低鈉和高鈣(gài)血症;淋巴(bā)瘤、胸腺瘤可(kě)見(jiàn)淋巴細胞異常升高,淋巴細胞性白血病則在淋巴細胞異常升高的同時伴有(yǒu)其他(tā)細胞係的減少。
淋巴細胞減少
淋巴細胞減少最常見的原因是內外源性(xìng)皮質類固醇激素增多(duō),導(dǎo)致其從血液循環中轉移到淋巴組(zǔ)織中(zhōng)。在急性炎症反(fǎn)應、病毒感染以及發生內毒素血症和(hé)敗血症時,也可見淋巴細胞減少。免(miǎn)疫缺陷病毒感染、免疫抑製(zhì)藥物的使用也會讓淋巴(bā)細胞生成減少。淋巴回流受阻或丟失也會讓其計數減少。
(A)淋巴細胞,特征是有深紫色圓形核;(B)單核細胞,特征是(shì)有腎形細胞核;(C)中性粒細胞,特征為有紫色多小葉細(xì)胞核。
(圖片來源:Bjorner & Zhu, 2019)
白細(xì)胞:中性粒細胞
中性粒細胞(bāo)增多
與其他哺乳動物一樣,急性(xìng)炎症反應的特征是中性(xìng)粒細胞增多並有核左移。但並不是出現中性粒細胞(bāo)增多就意味著急(jí)性炎症反應,動物經曆劇烈(liè)運動、驚(jīng)嚇傷心等強烈情緒後也可出現生(shēng)理性(xìng)中性粒細胞增多,但不會出現核左移。
應激(jī)或皮質類固醇也可導致動物出現中性粒細胞數(shù)量增加,無左移。
此外慢性粒細胞性白血病、中性(xìng)粒細胞功能障(zhàng)礙也可使中性(xìng)粒細胞數量增加,同時(shí)出現核左移、多組織髓外生成粒細胞、血小板減少等異常。
正常情況下,外周血液(yè)中性粒細胞以分葉核為主,胞核常分為2~5葉,杆(gǎn)狀核較少。中(zhōng)性杆狀核粒細胞增多或(和)出現晚幼粒細(xì)胞、中幼粒細胞,甚至原始(shǐ)/早幼(yòu)粒細胞的現象,稱為核左移。
中(zhōng)性(xìng)粒細胞減少(shǎo)
中性粒細胞減少也非常常見,其中臨床常見的因素為嚴重的細菌(jun1)感染,例如肺炎、敗血症、腹(fù)膜炎等(děng),常會伴隨核左移和中毒性變化。骨髓疾病、藥物毒性、病毒感染和腫(zhǒng)瘤等也可造成中性粒細胞(bāo)減少,同時(shí)可(kě)能會伴有紅(hóng)細胞和血小板的(de)減少。
白細胞(bāo):嗜酸性粒細胞
嗜(shì)酸性(xìng)粒細胞(bāo)主要聚集在皮膚、消化道和呼吸道黏膜等疏鬆結締組織(zhī)中,它的增多常見於寄生蟲感染的動物和發生I型超(chāo)敏反應的動物。也由於其(qí)分布特點,大多血液寄生蟲不會引(yǐn)起嗜酸性粒細胞增多。此外,還有一些臨床原因可導致嗜酸性粒細胞增多,比如(rú)嗜酸性粒細胞性腸炎、嗜(shì)酸(suān)性肌炎等炎症反應;某些能促進嗜酸性粒細胞生成和釋放的腫瘤(淋巴瘤(liú)、鱗狀細胞(bāo)癌等);腎上腺皮質機能減退等。
白細胞:嗜堿性粒細胞
嗜堿性粒細胞參與遲發性過敏和(hé)寄生蟲免疫反應,因此嗜堿性粒細胞增多(duō)症常(cháng)和嗜酸性粒細胞增多(duō)症同時發生。此外還可見於(yú)高脂血症、嗜堿性粒細胞性白血病和骨髓增生性疾病。
白細胞:單核細胞
單核細胞等主要功能是吞噬作用、調節炎症反應、參與抗原提呈、參與鐵的調節。因此當機體出現急(jí)性(xìng)或慢性炎症、組(zǔ)織壞死時,都會導致單核細胞增(zēng)多。中性粒細胞減少時也會出現單核細胞代(dài)償(cháng)性增加。其他不常見的原因還包括應激或類固(gù)醇、單核細胞白血病等。齧齒(chǐ)類動(dòng)物中,多達25%的(de)F344大鼠會發生單核細胞(bāo)性白(bái)血病(bìng)。發病動物外(wài)周血中,可(kě)見非典(diǎn)型性單核細胞,白細胞計數(shù)極度增高和溶血性貧(pín)血。
血小板(bǎn)
血小板為骨髓巨核細胞胞(bāo)漿裂解(jiě)脫落的小塊胞質,其主要作用是凝血和止血,修補破損(sǔn)血管。齧(niè)齒類動物(wù)的血小板(bǎn)數量和凝血過程與其他哺(bǔ)乳(rǔ)動物相似。在小鼠、大鼠(shǔ)或(huò)豚鼠中,未觀察到血小板計(jì)數的(de)性別(bié)或品係差異(yì)。大鼠的血小板會聚集,計數往往不可靠。
血小板減少
血小(xiǎo)板減少症發(fā)生時,動物(wù)可出現瘀斑、瘀點、黏膜出血、止血困難等。但(dàn)血液(yè)分析儀判讀為血小(xiǎo)板減(jiǎn)少(shǎo)時,應做血塗片確(què)認(rèn)是否發生凝集(jí),因為血小板做血(xuè)液采(cǎi)集、運輸、儲存過程中會活化並凝集進而影響機器讀取數(shù)據。通過無創性靜脈穿刺采血、使用檸檬酸鹽抗凝劑、減少采(cǎi)樣後儲存時間、避免低溫等措施可以減少這(zhè)種影響。
通常血(xuè)小板減少是一過性的,跟多種係統性疾病都有關聯,隨著(zhe)疾病的康複,血小板計數也會恢複正(zhèng)常。持續性的或(huò)進行性的血小板減少症表明血小板生成或消耗持續失衡。例如血小板減少伴隨(suí)白細胞減少和(或)貧血通常提示骨髓疾(jí)病引起的造血功能障礙;免疫介導的破壞等。
血小板增多
血小板計數增多可能由原發性血小板增多症(zhèng)、骨髓增殖(zhí)性疾病和(hé)繼發性血小板增多症引起。