
齧齒類實(shí)驗動(dòng)物常見(jiàn)的鞭毛蟲
鞭毛蟲屬於原蟲,即具有獨立完成生命活動的單細胞真核生物,在生物學分類上隸屬於肉足鞭毛門,鞭毛亞門,動物(wù)鞭毛(máo)綱。鞭毛蟲顧名思(sī)義,鞭毛為(wéi)其特征,滋養體(tǐ)階段有一根或多根鞭(biān)毛(máo),但也有些特(tè)殊種類為阿米巴型(xíng),會存在無鞭毛形態。本篇將介紹齧齒類動物中常見的鞭(biān)毛(máo)蟲(chóng)。
齧齒類(lèi)實驗動物常見的腸道(dào)鞭毛蟲
01毛滴蟲
毛(máo)滴蟲隸屬於毛滴蟲目(Trichomonadida),毛滴(dī)蟲科(kē)(Trichomonadidae),該科分為兩個屬,毛滴蟲屬(Trichomonas)和三毛滴(dī)蟲屬(Tritrichomonas)。目前已(yǐ)知至少有四種毛滴蟲可以感(gǎn)染齧齒類(lèi)動物,包括(kuò)小(xiǎo)鼠三毛滴蟲(Tritrichomonas musculis)、人五(wǔ)毛滴蟲(Pentatrichomonas hominis)、鼠三毛滴蟲(Trichomonas muris)和微小三毛(máo)滴蟲(Tritrichomonas minuta)。其中鼠三毛滴(dī)蟲是齧齒類實驗動物最常見的鞭毛蟲,它具有滋養(yǎng)體和假(jiǎ)包囊兩種(zhǒng)存(cún)在形式。其滋養體大小約18~24umx12~14um,呈梨形;假(jiǎ)包囊呈(chéng)球形,直徑約8um~13um。
包囊是原蟲在其生活階段中,由(yóu)蟲體本身(shēn)形成的一層(céng)較(jiào)厚的外膜,具有較強的抵抗(kàng)作用;當這個外膜並非由蟲體本身形成,而是來(lái)源(yuán)於宿主,則稱為假包囊。在(zài)生活期或運動期,吸(xī)取外界營養而生長的蟲體,稱為(wéi)滋養體。滋養體較脆弱,無法(fǎ)在轉移宿主過程中存活,通常不具有傳(chuán)染性。鼠三(sān)毛滴蟲的假包囊是它的(de)感染階段,假包囊對(duì)幹燥(zào)的環境抵(dǐ)抗不佳,一般存活不超過48h。
鼠(shǔ)三毛滴蟲的感染途徑是動物攝入或接觸到含有假包囊的糞便或墊料等,假包囊進(jìn)入(rù)到體(tǐ)內後,由消化液等(děng)作(zuò)用轉化為滋養(yǎng)體,滋養體在盲腸中增殖;滋養體進入到結腸後,由於環境幹燥,再(zài)次(cì)轉化為假包囊,隨後排出體外。有資(zī)料顯示,在盲腸中滋養(yǎng)體和(hé)假包囊比例(lì)約為8:1,在結腸中滋養體和假包囊比例約為1:1。因此,在動物(wù)排出的糞便中(zhōng),多數檢測到的都是假包囊。雖然鼠三毛滴(dī)蟲一直以來被認為是非致病性鞭毛(máo)蟲,但也有(yǒu)資料顯示鼠三毛滴蟲可引起實驗動物的厭食和腹瀉。
40× 紅色箭頭為鼠(shǔ)三毛滴蟲,可見明顯波動膜(mó)
40× 紅色箭頭為毛滴(dī)蟲偽包囊,藍(lán)色箭頭(tóu)為滋養體
02賈第(dì)鞭毛蟲
賈第鞭毛(máo)蟲在(zài)生物學分類上(shàng)隸屬於雙滴目(Diplomonadida),六鞭(biān)科(Hexamitidae),賈第屬(Giardia),屬於致病性鞭毛蟲(chóng)。賈第屬的形態很相(xiàng)似,但具有種屬特異(yì)性,因此根據宿主而分為不同的蟲種。感染(rǎn)齧(niè)齒類動物的(de)蟲種有腸賈第(dì)鞭毛蟲(又(yòu)稱十二指腸賈第鞭毛蟲或藍氏賈第鞭(biān)毛蟲)(Giardia intestinalis/duodenalis/lamblia)、倉鼠賈第鞭毛蟲(G. cricetidarum)、鼠賈第鞭(biān)毛蟲(G. muris)和微小賈第鞭(biān)毛蟲(G. microti)。腸賈第鞭毛蟲根據其基因型被分(fèn)為8個型,其中G型會感染齧齒(chǐ)動物。
賈第鞭毛蟲具有滋(zī)養體和包囊(náng)兩種時期,滋養體呈典型的倒置梨形,呈“落葉”式運動;包囊(náng)呈卵圓形,長8~10um,寬7~10um。由於(yú)蟲體可在包囊內增殖,所以有(yǒu)時可(kě)在包囊(náng)內看見兩個或(huò)四(sì)個核。滋養體是其生(shēng)長、發育和增殖期;四核的包囊則(zé)為感染期。賈第鞭毛蟲通過攝入或接觸含包囊的糞便或飲用水(shuǐ)等進行傳(chuán)播,包囊(náng)進入消化道內(nèi),經胃酸(suān)刺激包囊會生成兩個滋養體;當(dāng)滋養體到達空腸時,又轉化成包囊。一般正常動物(wù)感染賈第鞭毛蟲(chóng)症狀不明顯,有時會出現體重減輕,毛發粗糙等症狀;但可能會導(dǎo)致免疫缺陷動物死亡。
40× 紅色箭頭(tóu)為賈第鞭毛蟲包囊
03鼠六鞭毛蟲
鼠六(liù)鞭毛蟲(Spironucleus muris,舊(jiù)稱Hexamita muris)在生物學分(fèn)類(lèi)上隸屬於雙滴目(Diplomonadida),六(liù)鞭科(Hexamitidae),六鞭屬(Hexamita)。鼠六鞭毛蟲具有(yǒu)滋養體和包囊兩種時期,滋養體呈細長梨形且兩側對稱,約7~9umx2~3um,呈(chéng)直線(xiàn)快速運動;包(bāo)囊呈橢圓形,約4x3um,包囊最多可含四個核。鼠六(liù)鞭毛蟲的生活史與賈第鞭毛蟲相似,體型比賈第小很多。
鼠六鞭毛蟲感染(rǎn)成年(nián)鼠和免疫功能正常鼠後一般無明(míng)顯症狀;但對於(yú)3-6周小鼠(shǔ),易出現慢性腸炎、體重減輕等症狀,更嚴重的會導致小鼠死亡。小鼠和倉鼠的鼠六鞭毛蟲可以相互傳播,但大鼠的鼠六鞭(biān)毛蟲具有種屬特異性。
40× 紅色箭頭為鼠六包囊
04唇鞭毛蟲
唇鞭毛蟲在生物學分類上(shàng)隸屬於旋(xuán)滴目(Retortamonadida),旋滴科(Retortamonadidae),唇鞭毛蟲屬(shǔ)(Chilomastix)。該屬目前已報道約29種,形態相似。鼠唇鞭毛蟲(Chilomastix bettencourti)寄生於齧(niè)齒動物盲腸中,具(jù)有滋養體和包囊兩(liǎng)個時期,包囊是感(gǎn)染期。滋養體呈梨形,約8.3~20.9umx6.6~8.4um;包囊呈檸檬型,約15x7um。腸唇鞭毛蟲(Chilomastix intestinalis)寄生於豚鼠,也具有(yǒu)滋養體和包囊兩個時期。
40× 紅色箭頭為鼠唇鞭(biān)毛蟲
40× 紅色箭頭為唇鞭毛蟲包囊
旋滴科的另一代表屬為旋滴蟲屬(Retortamonas),這一屬(shǔ)形態(tài)和唇鞭毛蟲屬很相似,在豚鼠(shǔ)中發現過。如豚鼠內滴蟲(Retortamonas caviae),具有滋養體和包囊兩種時期(qī),滋養體呈梨形,約4~7umx2.4~4.3um;包(bāo)囊呈檸檬狀,約4.2x3.5um。
05其他鞭毛蟲
還有一些不常見的鞭毛蟲,如小鼠中(zhōng)曾(céng)發現過的倉鼠四毛滴蟲 (Tetratrichomonas microti)以及(jí)豚鼠中曾發現(xiàn)的脫(tuō)莫室(shì)滴(dī)蟲( Oikomonas termo)、奧(ào)古旋(xuán)滴蟲(chóng)( Spiromonas augusta)和活動(dòng)豚鼠毛滴蟲(chóng)( Caviomonas mobilis)等。但目前(qián)僅有資(zī)料對這些鞭毛蟲的形態進行描述,其致病性及防治方麵研(yán)究甚少。
鞭毛蟲的檢(jiǎn)測
在進行(háng)鞭毛蟲檢測時,對(duì)於一些滋養體狀態的鞭毛蟲,鏡檢法可容易檢出;但對於一些假包囊和(hé)包囊(náng)狀態的鞭毛蟲,就需要檢測人員有一(yī)定(dìng)的(de)經驗積(jī)累。根(gēn)據上述部分鞭毛蟲的生活史,在鏡檢時應盡量選擇(zé)新鮮回盲腸內容物(wù),可通過辨認(rèn)滋養體,從而(ér)提高檢出率。
核酸檢測技術目前也常用在鞭毛蟲的檢測中,如PCR、qPCR、巢式PCR、LAMP技術等。PCR方法可以(yǐ)通過擴增鞭毛蟲18S rRNA、16S rRNA、5.8s rRNA和ITS等保守(shǒu)基因,對鞭毛蟲達到種水平鑒(jiàn)定。但由於實驗動物感染鞭毛蟲的多樣性,對引物要求(qiú)較高(gāo)。因此,核酸檢測技術在鞭毛蟲的鑒定分類(lèi)應(yīng)用上還有很大的發展空間。
鞭毛蟲對動物的影響
雖然大部分鞭(biān)毛蟲均顯示對齧齒類實驗動物無致(zhì)病性,但這些鞭毛蟲(chóng)對齧齒類實驗動物的行為改變和免疫狀態改變均應當引起重(chóng)視。目前也(yě)有越來越多的研究顯示,鞭毛蟲可以影響齧齒類實驗動物細胞因子的(de)分泌;對實驗動物部(bù)分生理生化指標的影響;引起動物腸道炎(yán)症等。
鞭毛蟲的預防和控製
規範動物房飼養流(liú)程,對進出(chū)人員進行培訓(xùn)管(guǎn)理,可以一定程度上預防鞭毛蟲傳播。動物房應當建立控製蟲害管理程序,野生的齧齒動物攜帶很多寄生蟲,具有(yǒu)很大的潛在風(fēng)險。首先一定要保證動物飲水(shuǐ)和飼料的潔(jié)淨度;選擇合適飼料,保(bǎo)證動物營養,從而增加免(miǎn)疫力;動物飼養流程(chéng)規範,避免不當操作而引起鞭毛蟲傳播;引入(rù)動物來源(yuán)穩定,避免引入疫區動物而汙(wū)染屏障設施;不同等級動物分區飼養,避免交叉汙染;增加對設施內動物質量(liàng)監測頻率,都可(kě)以(yǐ)對鞭毛蟲的傳播起到預防作用。
在發現陽性動物(wù)後,應迅(xùn)速隔離(lí)陽性(xìng)動物並進行篩查,防止擴散傳播。在飲用水中加入硝基咪唑類藥(yào)物,如甲硝唑和替硝唑,可以對鞭毛蟲(chóng)起到(dào)控製作用,但並不能完全清除;近(jìn)年來有一些研(yán)究證明甲硝(xiāo)唑對大鼠和小鼠有致癌致突變性,替硝唑副(fù)作用較小(xiǎo)。賈第鞭毛蟲還可以選擇芬苯達唑、甲(jiǎ)苯達唑和阿(ā)苯達(dá)唑。但若想對設施內鞭(biān)毛蟲進行完全清除(chú),建議篩查並淘汰陽性(xìng)動物。淘汰陽性動物後,應及時清理汙染的糞便及墊料,並進行無害化處理;對汙染(rǎn)的籠具可進行高溫滅菌處理。
一般鞭毛蟲對消毒劑都比較敏感,可使(shǐ)用季銨(ǎn)鹽類消毒劑對房間進行定期消毒處理,也可有效(xiào)控製鞭毛蟲(chóng)傳播。鞭毛蟲的包囊和(hé)偽包囊對幹燥(zào)環境比較敏感,在幹燥環境中存活時間較(jiào)短,同時該時期也是大部分鞭毛蟲的感染期。保持動物飼養環境幹(gàn)燥,也可以對鞭毛蟲傳播起(qǐ)到控(kòng)製作用。
如需徹底清除鞭毛蟲,可以使用剖腹產技術(shù)和胚胎移植技術達到(dào)淨化目的。