目 的

靈長類獸醫協會（huì）（APV，Association of Primate Veterinarians）意識到（dào）在非人類靈長類（lèi）動物（NHP，Non-human primate）中，腦脊（jǐ）液（CSF，Cerebro-Spinal Fluid）的采集可能（néng）對於臨床和生物醫學研究都是必需的。由於這項技術存在固有風險，實驗動（dòng）物獸醫應確（què）定腦脊（jǐ）液采集對臨床評估的必要性（xìng）和實用性。為了生物醫（yī）學研究目的（de）而進行腦脊液（yè）采集須在動物護理和使用委員會（IACUC，Institutional Animal Care and Use Committee）或等同的監管機構批準下進行。以下建（jiàn）議為IACUC、使用非人類靈長類（lèi）動（dòng）物模型的研究人員以及獸醫人（rén）員提供基本信息，以供在（zài）製（zhì）定腦脊液采集相關的政策（cè）和標準操作程（chéng）序（SOP，Standard Operating Procedure）時予以考慮。

背 景

腦脊液分（fèn）析是一（yī）種強（qiáng）大（dà）的（de）工具，可加強對中樞（shū）神經係統內發生的各種過程的檢測，例如（rú）：出血、炎（yán）症、感（gǎn）染、腫瘤和其他臨床（chuáng）情況。此外，對腦脊液中化合（hé）物（如激素、藥物、神經遞質、生物標誌物、代謝產物和病毒）進行係列評估，在基礎研究和轉（zhuǎn）化研究中同樣非常重要。中樞神經係統中的腦脊液體積可通過腦脊液的（de）分泌和吸收（shōu）而維持穩定。

操作注意事項

腦（nǎo）脊液通常通過腦池或腰椎間隙穿刺采集。其中，通過腰椎穿刺采集腦脊（jǐ）液的並發症風險相對較低。因為在大多數非人類靈長類動物中，腰椎穿刺位點遠離脊（jǐ）髓的末端。應適（shì）當麻醉（zuì）動物，並使用無菌技術進行（háng）操作，包括剃（tì）毛等術部準備和無菌材料的（de）使用。至少需使用無菌手套、注射器和針頭（tóu），還可考慮使用無菌手術創巾。腦脊液采集通常以側臥位、胸骨臥位或坐位進（jìn）行，分別通過（guò）頸部或脊（jǐ）柱（zhù）的屈（qū）曲來改善對腦池的進入或擴大椎間隙（Gereschlager，1987；Magden，2015；Wolf，2012）。選擇的針頭尺（chǐ）寸和長度應適合非人類靈長（zhǎng）類動物的種屬和體型（Brady，2000；Cereschlager，1987；Magden，2015；Wolf，2012）。操作時使用的技術（shù）、設備和耗材，以及圍手術期的（de）護理因動物種屬、研究目的和臨床（chuáng）獸（shòu）醫的偏好而不同。

有些研（yán）究方案可能需隨時間推（tuī）移而連續采集腦脊液，或需采集未麻醉的受試對象的腦脊液樣本。對於這些方案，可通過長期植入的腦脊（jǐ）液穿（chuān）刺導管從清醒狀態的恒河猴身上連續采集腦脊液，而該導管可連接至皮下的采集接入口（kǒu）（Gilberto，2003；Gilberto，2022；MacAllister， 2016）。

在編寫本文件時，作者盡一切努力尋找總腦脊液體積的數值、硬腦膜穿刺的次數限製或建議、采集頻率、安全的抽取體積（jī）以及腦脊液補充速率相關的最新參考文（wén）獻。對於（yú）大多數靈長類動物，這方麵的（de）文獻很有限。此外，采集方法（fǎ）也（yě）各不相同，因（yīn）為從靈長類獸（shòu）醫協會成員收集的調查結（jié）果表明，各（gè）機構均（jun1）可成功地（dì）使（shǐ）用多種不同的方法采集腦脊液。因此，作者根據現有的最佳證據提供了腦脊液采集的考慮因素和建議。

作為參考，先前的研究已確定成年雄性恒河猴（8.0-10.6kg）的表（biǎo）觀腦脊液體（tǐ）積為10+/-0.06 mL，腦脊液流速為0.018+/-0.003 mL/min（McCully，2020）。恒河猴的腦（nǎo）脊液形成速率範圍為28.6-44.2 μL/min（Curran，1970；Lux，1975；Martins，1977）。在這（zhè）方麵需（xū）要對非人靈長類動物進行進一步的研究，以促進更具指導性建議的製定。

潛在不良反應

雖然在非人（rén）類靈長類動物中進行腦脊液采集時報道的並發症很少，但解剖變異以及不適當或技術不佳的操作方法可（kě）能導致樣本受損或並發症，如出血，腦疝，感染，腦幹、脊髓或神經根損傷以及（jí）動（dòng）物的不（bú）適。這些並發症雖然罕見，但（dàn）可能會損害動物福利。

由於存在風險，應由獸醫或經過培訓的獸醫（yī）人員采集腦脊液。對於未（wèi）成（chéng）功（gōng）的腦脊液采（cǎi）集嚐試，實踐可能（néng）有所不同。常見做法是允許（xǔ）一個人進行最多三次未成功的嚐試（shì）。在第三次（cì）嚐試失敗後，應（yīng）由（yóu）另一位合格的人員接替。如果第二個人在三（sān）次嚐試後仍無法采集到腦脊液，則停止嚐試。同時動物將接受適當的鎮痛治療，並（bìng）從麻醉中（zhōng）恢複。在嚐試失敗後更換采集部位（例（lì）如從腦池到腰椎）通常可成功。如果是未進（jìn）行成像的失敗嚐試，則可使用X線透視輔助穿刺針放置。除提高成功（gōng）率（lǜ）外，影像引導還可降低創傷性（xìng）穿（chuān）刺的發（fā）生（shēng）率。（Eskey，2001）

術後監測應持續進行，直到動（dòng）物返回其籠內，並能在（zài）沒有支撐的情況下保持直立姿勢。對動物的監測應該至少持續24小時或根據IACUC批（pī）準的方案進行。監測應包（bāo）括對基本的生理、行為（wéi）和（hé）運動參數的評估。尤其應評估動物是否出現神經功能障礙的跡象（xiàng），包括但不限於嗜睡、抑鬱、昏迷和頭部（bù）壓迫感等。在人類醫學中，腦脊液采集後出現的頭痛和由此引起的顱內低壓並不少見。考慮到非人類靈長類（lèi）動物中的這種潛在後（hòu）遺症，應在手術時給予鎮痛治療，並延長（zhǎng）2-3天，或根據與頭痛或脊柱疼痛相關行為的術後觀察結果按需（xū）提供鎮痛治療。最有效（xiào）的（de）鎮痛（tòng）方案可能是術前即開（kāi）始綜合（hé）治療。

IACUC注意事項和記錄（lù）保存

IACUC應了解腦脊液采集的相關工作以及所有可能的並（bìng）發症，並至少每年對其審查。所有相關信（xìn）息，如（rú）藥物劑（jì）量、術前準備、采集的腦脊液體積、采集頻率以及術後短期和長（zhǎng）期恢複情況，均應在IACUC方案中進行描述，並在醫療記錄或實驗（yàn）室日（rì）誌（zhì）中適當地記錄。

腦脊液（yè）可能是研究方案中的關鍵資料，但如果采集（jí）技術不恰當，可（kě）能會對動物福利產生影響（xiǎng）。遞交方案時，應提供采集（jí）次數和頻率的（de）科學依據。具體而言，IACUC還應仔細評估涉及腦脊液采集的每個提案，並考慮以下問題：

1.腦脊液采集是否對實現方案中所述的科學目標至關重要？

2.是否有替代方法和侵入性較小的中樞神經係統評價方法（如成像技術（shù））可供選擇，如果有，是否考慮過？

3.操（cāo）作人員是否接受過適當的（de）培訓（xùn）並具備足夠的技能？

4.是（shì）否將提供適當的圍手術期（qī）麻（má）醉和鎮痛方案？有關麻（má）醉和鎮痛計（jì）劃，應谘詢實驗動物獸（shòu）醫。

5.采集的腦脊液體積是否符合動物的年齡和體型考慮？

6.腦膜穿（chuān）刺的次數和頻率是否適（shì）合動物，以及並發症風險是否已降到最（zuì）低？如果（guǒ）多次采集腦脊液為研究的一部分，應明確規定每隻動物的（de）最大采集（jí）次數。

7.術（shù）後監測計劃是否（fǒu）適當？

8.是否考（kǎo）慮了所有可（kě）能的術後並發症，並列出了所有合理（lǐ）的幹預方法，包括安樂死？

原文：

Association of Primate Veterinarian :Guidelines for Cerebrospinal Fluid Aspiration for Nonhuman Primates in Biomedical Research.