
實驗(yàn)大小鼠食物和飲水的限製
背(bèi)景
實(shí)驗大小鼠通常可以自由采食(shí)和飲水。然而,在行為學、代謝學或胃腸道研(yán)究中,適當的食物(wù)或水分的限(xiàn)製往往是實驗實施所必需的。盡管如此,即使在實施此類限製(zhì)措施時,也必須確保動物的健康狀況,避免其承受不必要的痛苦與(yǔ)壓力。
不同物種對食物或(huò)水分限製下的生理反應存在差異,因(yīn)此實驗(yàn)設計需充分考慮這些特性。齧齒動(dòng)物主要在暗周期內攝(shè)取大部分日常食物和水分,因此“過(guò)夜”禁食通常等同於24小時(shí)禁食。此外,相較於食物限製,大小鼠對12至24小時甚至(zhì)更長時間的水分限製具有更高的耐受性(xìng)。
與(yǔ)其他物種相比,小鼠和大鼠的胃(wèi)腸(cháng)道排空速度較快:小(xiǎo)鼠的(de)胃排(pái)空時間約為3.5小時,腸道排空(kōng)時間約為6小時;而大鼠的胃(wèi)排空時間約為2.5小時,腸道排空時間(jiān)約為4小時。因此,在進行胃腸道研究或需要在灌(guàn)胃前清空胃部內容物的實驗設(shè)計中,應充分考慮這些特性,以確保實驗的準確與可重複性。
定義
食物(wù)限製:動(dòng)物(wù)連續4小時或以上無法獲得食物。
飲水限製:動物連續4小時或以上無法獲得飲水(shuǐ)。
政策
當大(dà)小鼠(shǔ)被從飼養架取出並運(yùn)輸(shū)到動物(wù)設施的操作室或外部實驗室時,尤其是(shì)如果它們從自動飲水係統中移除超過4小時(shí)(對於小鼠)或6小時(對於大鼠),則必(bì)須提供水源(水瓶(píng)或補水凝膠)。
當使(shǐ)用短期食物限製以空腹進行(háng)灌胃時(shí),應充分考慮胃排空時間(jiān),小鼠禁食超過4小時和大鼠禁食(shí)超過6小時的情況必須有充分的科(kē)學依據(jù),並獲得IACUC的批準。需要解釋所提(tí)方案對於該物種和實驗的適用性。如果食物或飲(yǐn)水(shuǐ)的限製是為了用於(yú)行為學研究,在可以到達預期行為學結(jié)果基礎上,將(jiāng)限製程度降到最低。在提出食物或(huò)飲水限製方案之前,應充分(fèn)考慮正向強化的方法(fǎ),例如使用誘人(rén)的食物或飲水“獎勵”的激勵行為。在初期訓練階段之後,可能需要(yào)程(chéng)度較輕的飲食(shí)或水限製(zhì),並相應地調整限製程度。每當動物通過食(shí)物或水“獎勵”獲得其飲食的一部分時,通過食物(wù)或飲水“獎勵”獲得的(de)食物和水的總量加上自由進食獲得的食物和水的總量必須足以維持動物的健康狀(zhuàng)態,而不會導致動物顯著的(de)體重(chóng)下降。根據2013年NIH《行為研究飲食控製指南》(Guidelines for Diet Control In Behavioral Research Studies),如果動物表現(xiàn)出脫水的症狀,包括但不限於皮(pí)膚彈性下降或眼窩凹陷,則必須通知獸(shòu)醫服務部門。除非另有IACUC批準,如果(guǒ)動物在限食或限(xiàn)水期間體重下降20%,必須立即增加攝取量,直到體重恢(huī)複,在動物使用方案中必須詳細說明這(zhè)一計(jì)劃。在幼齡動物進行研究時,應特別關注其正常生長對飲(yǐn)食的需求。許多齧齒類實驗動物(wù)的正常生長曲線已經發表,在製定幼齡動物的食物或水限製計劃時應參考這些生長曲線。
當不提供自由采食的食物或水時,則應允許動物在行為訓練期間獲得足夠的(de)食物和水,或者每天適當補充其攝入量。在行為(wéi)訓練(liàn)和/或補充期間,應(yīng)同(tóng)時提供食物和水,以盡量減少因脫水引起的厭食症(zhèng)。在(zài)需要補充的情況下,每日提供的(de)食物和飲水的量應等同於動物在自由采食條件下通常消耗的量(liàng),或在實驗需要的情況(kuàng)下輕度限製的量(如(rú)消耗量的80%),並得到(dào)IACUC的特別(bié)批(pī)準。必須獲得限製前的數據以確定適當的限(xiàn)製量,或提供參考範圍給IACUC。除非在IACUC方案中另有說明,否則從自由采(cǎi)食過渡到食物或(huò)飲水(shuǐ)的限製應逐步(bù)進行,持續一到多天,以盡量減(jiǎn)少動物的壓力。當食物或飲(yǐn)水(shuǐ)的獲取時間受(shòu)到限製時,應在動物光(guāng)/暗周期中的一致時間提供(gòng),以使行為適應研(yán)究時間表。
當食物和水用作行為激勵時必須(xū)在IACUC方案中說明其類型和濃度(如適用)。食(shí)物和飲水獎勵物品應盡量減少向SPF動物引入病原的風險,優先選擇經過輻照(zhào)或高壓滅菌處理,專用(yòng)於齧齒類行為獎勵的食物。如果(guǒ)使用未經輻照或(huò)高(gāo)壓滅菌處理的食物,必須在在IACUC方案中(zhōng)提供充分的理由。如果動物的(de)大部(bù)分日常食物攝入(rù)發生在行為測(cè)試(shì)期(qī)間(jiān),則應選擇營養均衡的齧齒類(lèi)動(dòng)物食物。
每隻(zhī)受到食物或飲水限(xiàn)製的動物必須由訓練(liàn)有素和有經驗的研究人員至少每天觀察和稱重一次。每日體重和攝食(shí)記(jì)錄必須保持,並(bìng)隨時提(tí)供給獸醫服務(wù)部(bù)門和IACUC審查。所有食(shí)物(wù)或飲水的限製方案都應明確說明如何監測動物的健康狀況(kuàng),並包括幹預標準(zhǔn),如體重減輕、身體狀況下降和/或脫水的臨床症狀。
小結
在實驗研究中,適當(dāng)的食物與飲水限製可為行為學(xué)、代謝學、胃腸道、藥理(lǐ)學和生理學研究提供關鍵的數據和重要的見解。然而,在實施限製時(shí),必須確保動物的健康與福利不受影響。通過科學設計、嚴格(gé)檢測和倫(lún)理審查(chá),研究人員可以(yǐ)在確保實驗準(zhǔn)確性的同時,最大程度地減少(shǎo)對動物的負(fù)麵影響。