
唐菖蒲伯克霍(huò)爾德氏菌
唐菖(chāng)蒲伯克霍爾德氏菌
唐菖蒲(pú)伯克霍爾德氏(shì)菌(Burkholderia gladioli),廣泛存(cún)在於自然環(huán)境(土壤、水源等)、食品(酵(jiào)米麵、銀耳等)中,致病力複(fù)雜。該菌的椰(yē)毒致病變種的有毒代謝產物(wù)導致的食物(wù)中(zhōng)毒事件在我國時有發生,因此在食品(pǐn)界是一種被廣泛關注的細菌。此外,該菌也見於院內感染,可引起免疫抑製(zhì)患者的肺炎、菌血症、慢性肉(ròu)芽腫性疾病,並可能最終導致患者的死亡。
在實驗動物領域,已有數篇文獻報道唐菖蒲伯克霍爾德氏(shì)菌感染實驗小鼠(shǔ),對動物健康和研究數據有重要影響。
01病原(yuán)學(xué)
唐菖蒲伯克霍爾德氏菌是一種需氧(yǎng)、運動(dòng)、不發酵的革蘭氏(shì)陰性杆菌,最(zuì)初在(zài)1921年被認為是唐菖蒲和其他花朵(duǒ)的植物病原體,雖然最(zuì)初認為是一(yī)種無害的共生生物,但(dàn)後來證實與人類感染有關,特別是在囊性纖維化(huà)或慢性肉(ròu)芽腫(zhǒng)性疾病患者中,免疫力(lì)低(dī)下患者的肺(fèi)炎、菌血症、頸(jǐng)部淋巴結炎及角膜炎也有報道。此菌存在於土壤、水、植物和水果中,該菌所屬的(de)伯克霍爾德氏菌的分類鑒定比(bǐ)較複雜,同屬的還有洋蔥伯克霍爾德(dé)菌、類鼻(bí)疽伯克霍爾德菌(見往(wǎng)期(qī)文章《人(rén)獸共患病之類鼻疽》)等22個種。
02流行病學
伯克霍爾德氏菌屬,由於其代謝的(de)多(duō)功能性,能產生多種(zhǒng)毒性因子和形成生物(wù)膜,使其能夠抵抗抗生素和免疫防禦。該菌(jun1)能耐受反(fǎn)滲透處理、紫(zǐ)外線消毒和酸化處(chù)理,能在惡劣的環境中生存。實驗(yàn)動物設施環境中,主要通過飲用汙染的(de)水和直接接觸感染動物傳播。
2004年,弗吉尼亞州的一家機構曾報道過在(zài)免疫缺陷(xiàn)小鼠中發生由唐菖蒲伯(bó)克(kè)霍爾德氏菌引起的中耳炎暴發案例。2007年,在法國的(de)一個設施中也(yě)發生了類似的案例。2019年,美國有學(xué)者研究(jiū)發(fā)現唐菖蒲伯克霍爾德氏菌的(de)感(gǎn)染與自動飲水係統、水瓶和飲水管等有(yǒu)關。近(jìn)幾(jǐ)年我國也有數個設施的飲水係統(tǒng)汙染導致免疫(yì)缺陷動物出現中耳炎暴發的案例。在某(mǒu)設施的唐菖蒲伯克霍(huò)爾德氏菌感染的暴發期,動物樣品培養法的陽性檢出率可(kě)以達到近10%,感染的(de)動物發生中耳炎的比例約(yuē)為16.1%。唐菖蒲伯克霍爾德氏菌也會與支原體、綠膿杆菌的(de)混合感染造成動物發(fā)病。第三方檢測機構蘇州西山生物2020-2024年的檢測數據顯示:唐菖蒲伯克霍(huò)爾德氏(shì)菌在腫瘤、細胞(bāo)等接種物中有2.7%的陽性率,汙染(rǎn)的(de)接(jiē)種物會引起動物(wù)發病甚至死(sǐ)亡。由這些(xiē)數據可見,不論是在國外還是國內(nèi),在生物製品、實驗小鼠以(yǐ)及環境樣本中,唐菖(chāng)蒲伯克霍爾德氏菌的感染都時有檢出,對(duì)動物實驗(yàn)的(de)順(shùn)利(lì)開展和動物健康都有非常大的負麵影響。
03臨床症狀及病理變化
齧(niè)齒類實驗動物感染唐菖蒲伯克霍爾德氏菌,尤其是免(miǎn)疫缺陷小鼠感(gǎn)染後,會出現體重減輕,駝背姿勢,嗜睡,脫水等(děng)非典型性症狀(zhuàng),嚴重的會共(gòng)濟失調,提起(qǐ)尾部時(shí)出現旋轉,部分動物出現頭部傾斜,盤旋,滾動等中耳炎的症(zhèng)狀,部分動物(wù)則(zé)會在(zài)頭頸部出現比較大的皮下膿腫。
解剖發現有耳道化膿病變(圖A),其組織病理(lǐ)學特征是中性粒細胞浸潤,淋巴細胞減少,有少量巨(jù)噬細(xì)胞(bāo)和漿細胞。另外肝脾腫大,肝髒可見多灶性圓形膿腫病灶(圖B),肝髒病變是(shì)從無相關病變到輕度亞急性血管炎,再(zài)到壞死(sǐ)性化(huà)膿(nóng)性肝炎(yán)。肺部病變(biàn)包括一些小鼠(shǔ)的輕度血管充血和輕度急性間質性肺炎。部分品(pǐn)係真皮和皮下層(céng)有炎症變化。
通常來說,采集病(bìng)變部位樣(yàng)本可以通過細菌分離鑒定(dìng)或PCR方法檢測到細菌或核酸,但由於采樣部位和方式、樣(yàng)本運輸等原因,可能會造成樣本(běn)質量不高,同時也由於伯克霍爾德(dé)氏菌屬的分類鑒定有一定難度,都可能使得檢測結(jié)果存在一定程度的漏檢和誤判。
圖A 耳道化膿性感染
圖(tú)B 肝髒有白色點狀斑塊(2mm)
04對研究的影響
如果動物感染了唐菖蒲伯克霍爾德(dé)氏菌,尤其免疫缺陷動物,會出現歪頭、膿(nóng)腫等中耳炎或皮膚的(de)症狀,肺、肝、脾(pí)等組織也會發生病理改變,從而影響動物行為學、細(xì)胞學和組織學相關的研究(jiū)。對於病人來源腫瘤異(yì)種移植(Patient-Derived Tumor Xenograft,PDX)模型研究,會影響動物的生存時間和實(shí)驗數據,耳道、肺髒和肝髒的炎症反應既是一種混淆變量,也可能會影響宿主對其他刺(cì)激的反應,因此嚴重影(yǐng)響研究數據的可靠性。
05預防和清除
唐菖蒲伯克霍爾德氏菌特別容易通(tōng)過汙(wū)染的飲水在實驗動物設施中擴散,因此對於飲水係統的消(xiāo)毒和對水的滅菌工作,可使用(yòng)高氯化,或者過(guò)氧乙酸和過氧化氫的組合(明保Minncare,康特(tè)爾醫療),使(shǐ)用2%的明(míng)保每年兩次對飲(yǐn)水係(xì)統進行消毒;對水瓶和(hé)飲水管要進行重(chóng)新消毒,並驗證其(qí)消毒效(xiào)果。在驗(yàn)證消毒(dú)效果時(shí),注意避免僅使用化學指示劑作為滅菌效果的唯一指標,還應使用生物指示劑驗證。對於飲水的(de)消毒,隻(zhī)有在徹(chè)底(dǐ)清潔所有供(gòng)水(shuǐ)係統組件並(bìng)重新驗證滅菌效果後,才能成功消除(chú)感染。
汙染的接種物是該菌另一重要(yào)感染源,因此在接種前,應檢(jiǎn)測接種物中是否汙染了該菌,隻有檢測結果為陰性的樣品才能用於實驗(yàn)。
有報道感染的動物可以使用5ml甲氧苄啶-磺胺溶於250mL的水中(40mg甲氧苄啶-200mg磺胺甲惡唑/5mL)飲水飼喂一周,但隻能緩解症狀(zhuàng)不能(néng)清除該菌。